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微生物生長以及測量方法

2016-06-06 11:18:07 497

      我們所說的微生物其實就是指一切肉眼看不到或看不清楚,因而需要借助顯微鏡觀察的微小生物。微生物包括原核微生物(如細菌)、真核微生物(如真菌、藻類和原蟲)和無細胞生物(如病毒)三類。

      微生物的基本單位是細胞,在合適的環(huán)境條件下細胞會生長,生長是指細胞物質(zhì)有規(guī)律、不可逆增加的過程,主要表現(xiàn)有機體的細胞組分與結(jié)構(gòu)在量方面的增加。也就是說微生物開始大量繁殖的起始,其繁殖定義為:微生物生長到一定階段,由于細胞內(nèi)各種細胞結(jié)構(gòu)的復(fù)制和重建,導(dǎo)致產(chǎn)生一個新的細胞個體,即引起細胞個體數(shù)量增加的整個生物學(xué)過程。

      總而言之,生長是一個逐漸發(fā)生的量變的過程,是繁殖的基礎(chǔ);繁殖是一個質(zhì)變的過程,是生長的結(jié)果。

      那么如何測定生長繁殖,我們可以通過以下三個實驗方法可得:個體計數(shù)、群體重量測定以及群體生理指標測定。

一、測生長量

測生長量的方法很多, 常見的有下面幾種:

(一)直接法

1、測體積:粗放型,在刻度離心管中測沉降量

2、測干重:精確型,離心法和過濾法獲得菌體細胞

可用離心法或過濾法測定,一般干重為濕重的10%~20%。

(二)間接法

1、比濁法:用分光光度法對無色的微生物懸浮液進行測定,一般選用450~650nm波段。

(三)生理指標法

微生物的生理指標,如氮、碳、DNA、ATP等物質(zhì)的含量,呼吸強度、耗氧量、酶活性、生物熱等與其群體的規(guī)模成正相關(guān)。以上指標可以借助儀器測量。

二、計繁殖數(shù)

    測定繁殖就是要一一計算各個體的數(shù)目。

1、直接計數(shù)法(全數(shù)):指采用計數(shù)板,在光線顯微鏡下直接觀察微生物細胞并進行計數(shù)的方法。缺點是不能區(qū)分死菌與活菌。但可以通過染色后活菌計數(shù)可以區(qū)分活菌與死菌。

2、間接計數(shù)法(活菌數(shù)):這是一種依據(jù)活菌在液體培養(yǎng)基中會使其變混或在固體培養(yǎng)基上(內(nèi))形成菌落的原理而設(shè)計。

(傳統(tǒng)法)平板菌落計數(shù)法:此法適用于各種好氧菌或厭氧菌。該法相對精確,但對實驗人員要求比較高,否則難以得到正確的結(jié)果。

      目前市場上出現(xiàn)快速、微型用于菌落計數(shù)的測菌片。原理是利用加在培養(yǎng)基中的活菌指示劑TTC(2,3,5-氯化三苯基四氮唑),它可使菌落在很微小時就染成容易辨認的玫瑰色。該法簡便,但比較粗放。

      通過以上的實驗數(shù)據(jù),我們可以了解單位時間里微生物數(shù)量或生物量的變化,可以客觀反映微生物生長的規(guī)律,從而進一步評價外界培養(yǎng)條件對微生物生長的影響,以及評價不同殺菌劑對微生物產(chǎn)生抑殺作用的效果。

      俗話說:知己知彼,百戰(zhàn)不殆。這些數(shù)據(jù)對我們構(gòu)建成功的ABP防腐防霉體系具有實際的指導(dǎo)作用。

 

 

附:ABP防腐體系:

(1)一個殺菌劑實際應(yīng)用效果的好壞,取決于以下三方面的有機統(tǒng)一:殺菌劑(antimicrobial agent)、生物(Biological)以及客戶的產(chǎn)品(Product)。

(2)成功的防霉防腐體系,不僅僅是殺菌劑工程師、微生物專家的事,也離不開和您的交流與探討。

(3)產(chǎn)品的防霉防腐要求都可以通過殺菌劑的選擇、微生物的試驗以及客戶的生產(chǎn)工藝得到圓滿的解決。


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